背景介紹:
絲氨酸和蘇氨酸翻譯后修飾是指蛋白質在合成后經歷的化學改性過程,中磷酸化和糖基化是最為常見的修飾形式。絲氨酸和蘇氨酸上的翻譯后修飾類型主要包括磷酸化、O-糖基化等類型。這兩種氨基酸殘基經修飾后,能顯著改變蛋白質的活性狀態(tài)、穩(wěn)定性及相互作用能力,從而對細胞信號轉導、代謝調控等多個關鍵生物過程起到重要作用。深入研究這些修飾有助于揭示生命活動背后的分子機制,并可能為疾病治療提供新的靶點。因此,絲氨酸和蘇氨酸翻譯后修飾在基礎生物學研究和臨床應用中具有不可或缺的重要價值。
科絡思生物具備先進的質譜技術,能夠直接且精確地解析多種類型的蛋白質翻譯后修飾及其發(fā)生的具體位點。通過巧妙結合分離富集技術和同位素標記等先進手段,可以實現對各類修飾的大規(guī)模、高通量定性和定量分析,為深入研究蛋白質翻譯后修飾提供了強有力的技術支撐。
技術平臺(針對O-糖基化):
O-連接的糖基化是將糖鏈轉移到多肽鏈的絲氨酸、蘇氨酸的氧原子上的生物化學過程。利用UDP-GalNAz、Y289L GalT1試劑,這些試劑能夠將糖基化位點上的糖分子標記上-N3基團,后續(xù)通過點擊化學、酶解、富集等步驟,并借助高分辨質譜技術,能夠精確地鑒定出O-糖基化的具體位點,從而揭示該翻譯后修飾在生物體內的重要作用。
我們的優(yōu)勢:
1.專業(yè)技術優(yōu)勢:團隊經驗豐富,頂級期刊發(fā)表,提供業(yè)界權威技術服務,個性化方案,保障最佳實驗效果。
2.嚴謹質量管理:成熟質量管理體系,遵循ISO9001標準,確保報告真實可信。
3.一站式服務:覆蓋探針設計、合成、靶點發(fā)現、生信分析全流程,咨詢到交付一站式,及時反饋進度,保證客戶滿意度。
4.高性能設備:配備Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480、Thermo Flsher Q Exactlve HF-X、Bruker timsTOF等先進質譜儀,助力科研突破。
我們的服務:
項目名稱 |
基于高分辨質譜的絲/蘇氨酸翻譯后修飾 |
樣品形式 |
裂解液、活細胞、組織樣本 |
硬件平臺 |
VanquishNeo UPLC液相串聯Orbitrap Exploris 480 mass spectrometer (Thermo Fisher Scientific); EASY-nLC1200 UPLC液相串聯Q E HF-X mass spectrometer (Thermo Fisher Scientific) |
項目周期 |
4-8周 |
交付標準 |
項目報告(包含膠圖、位點信息等) |
價格 |
咨詢 |
案例展示:
1.O糖基化
項目目的:本項目旨在通過質譜技術,對O-GlcNAcylation翻譯后修飾進行深入的化學蛋白質組學分析。
解決方案:采用代謝標記與質譜相結合的方法,對O-糖基化的位點進行精確且全面的定性分析。在實驗過程中,首先利用熒光膠技術確定Y289L GalT1酶的量,隨后,按照嚴格確定的實驗條件進行質譜分析。經過兩次重復實驗,共同鑒定到了36個可信的糖基化位點。示例為其中一個典型的二級譜圖。
2.N糖基化
N-糖基化是真核生物中最普遍的糖基化形式,它在蛋白質折疊、定位、運輸、穩(wěn)定性等方面發(fā)揮重要作用。將蛋白變性、還原烷基化、酶切處理后,在H218O緩沖液環(huán)境中使用去糖基化酶處理,則將含復合型糖鏈修飾的天冬酰胺轉化為帶有18O的天冬氨酸,對該特定修飾變化進行鑒定,結合N-X-S/T motf識別,確定蛋白的N-糖基化修飾位點。
N糖基化流程圖
N糖基化實驗數據圖